تاریخچه ی:
آماده سازی بافت
تفاوت با نگارش: 1
- | __آماده سازی بافت (Tissue Preparation)__
||برای مطالعه بافت و ارگانهای مختلف توسط میکروسکوپ باید آنها را به روش خاصی آماده کرده و در ابعاد بسیار ریز برش داد، به این اعمال در مجموع ، ''آماده سازی بافت'' میگویند که با روشهای مختلفی انجام میگیرد.|| |
+ | ||برای مطالعه بافت و ارگانهای مختلف توسط میکروسکوپ باید آنها را به روش خاصی آماده کرده و در ابعاد بسیار ریز برش داد، به این اعمال در مجموع ، آماده سازی بافت یا __~~green:Tissue Preparation ~~__میگویند که با روشهای مختلفی انجام میگیرد.||
{img src=img/daneshnameh_up/2/29/histology1.JPG}
|
|
| !مقدمه | | !مقدمه |
- | هنگام مشاهده و مطالعه اجسام توسط ((میکروسکوپ)) ، ضخامت شی مورد مطالعه باید به اندازهای باشد که نور عبور کرده از کندانسور میکروسکوپ بتواند از آن عبور کرده و به عدسی شیئی برسد. در غیر این صورت هیچگونه تصویری مشاهده نخواهد شد. بنابراین جهت مطالعه ((بافت)) و ارگانهای مختلف باید آنها را به روش خاصی آماده و به ضخامت 5 تا 10 میکرون برش داد که این اعمال در مجموع ، ''آماده سازی بافت'' نام دارد.
آماده سازی بافتها جهت مطالعات میکروسکوپی با روشهای متعددی انجام میگیرد که اساس این روشها شامل مراحل زیر است: |
+ | هنگام مشاهده و مطالعه اجسام توسط ((میکروسکوپ نوری|میکروسکوپ)) ، ضخامت شی مورد مطالعه باید به اندازهای باشد که نور عبور کرده از کندانسور میکروسکوپ بتواند از آن عبور کرده و به عدسی شیئی برسد. در غیر این صورت هیچگونه تصویری مشاهده نخواهد شد. بنابراین جهت مطالعه ((بافت بدن|بافت)) و ارگانهای مختلف باید آنها را به روش خاصی آماده و به ضخامت 5 تا 10 میکرون برش داد که این اعمال در مجموع ، آماده سازی بافت نام دارد. آماده سازی بافتها جهت مطالعات میکروسکوپی با روشهای متعددی انجام میگیرد که اساس این روشها شامل مراحل زیر است. |
| !نمونه برداری | | !نمونه برداری |
- | برای مطالعه ساختمان ارگانها ، تکههای کوچک 1 تا 2 میلیمتری از آنها مورد نیاز میباشد که عمل برداشتن تکههای کوچک را ''نمونه برداری'' و خود تکه بافتی را ''نمونه'' (Specimente) مینامند. نمونه برداری به دو صورت انجام میشود:
*__نمونه برداری از بدن موجود زنده__ که اصطلاحا biopsy نامیده میشود و با استفاده از سوزنهای ویژهای انجام میگیرد.
*__نمونه برداری از جسد__ ، بلافاصله بعد از مرگ موجود. |
+ | برای مطالعه ساختمان ارگانها ، تکههای کوچک 1 تا 2 میلیمتری از آنها مورد نیاز میباشد که عمل برداشتن تکههای کوچک را نمونه برداری و خود تکه بافتی را نمونه (Specimente) مینامند. نمونه برداری به دو صورت انجام میشود:
*__~~green:نمونه برداری از بدن موجود زنده~~__ که اصطلاحا biopsy نامیده میشود و با استفاده از سوزنهای ویژهای انجام میگیرد.
*__~~green:نمونه برداری از جسد~~__ ، بلافاصله بعد از مرگ موجود.
{img src=img/daneshnameh_up/3/3f/histology2.JPG}
|
|
| !ثابت کردن (Fixation) | | !ثابت کردن (Fixation) |
- | بعد از مرگ موجود زنده ، فعالیت ((آنزیمها|آنزیمهای درون سلولی)) باعث فاسد شدن و تخریب ساختمان سلولی و بافتی میگردد. بنابراین برای جلوگیری از تغییرات پس از مرگ ، نمونه بافتی جدا شده از بدن بایستی بلافاصله در داخل ((محلولهای ثابت کننده)) (Fixative) قرار گیرد. محلولهای ثابت کننده ضمن پیوند با ((پروتئین|پروتئینها)) ، باعث غیر فعال شدن آنزیمها شده و از انهدام ساختمان سلولها و بافتها ، جلوگیری میکنند.
محلولهای فیکساتیو بسیار متنوعند، ولی معمولیترین آنها برای استفاده در آزمایشگاههای بافت شناسی و آسیب شناسی ''((فرمالین)) 10 درصد'' میباشد. به منظور فیکسه کردن بافتها ، آنها را به مدت 24 الی 48 ساعت ، در محلول فیکساتیو قرار میدهند. |
+ | بعد از مرگ موجود زنده ، فعالیت ((آنزیمها|آنزیمهای درون سلولی)) باعث فاسد شدن و تخریب ساختمان سلولی و بافتی میگردد. بنابراین برای جلوگیری از تغییرات پس از مرگ ، نمونه بافتی جدا شده از بدن بایستی بلافاصله در داخل محلولهای ثابت کننده (Fixative) قرار گیرد. محلولهای ثابت کننده ضمن پیوند با ((پروتئین|پروتئینها)) ، باعث غیر فعال شدن آنزیمها شده و از انهدام ساختمان سلولها و بافتها ، جلوگیری میکنند.
محلولهای فیکساتیو بسیار متنوعند، ولی معمولیترین آنها برای استفاده در آزمایشگاههای بافت شناسی و آسیب شناسی فرمالین 10 درصد میباشد. به منظور فیکسه کردن بافتها ، آنها را به مدت 24 الی 48 ساعت ، در محلول فیکساتیو قرار میدهند. |
| !آبگیری (Dehedration) | | !آبگیری (Dehedration) |
- | بافتها بطور طبیعی دارای مقداری آب هستند که اگر از بافت خارج نگردد، مانع نفوذ برخی از مواد آماده کننده (مانند ((پارافین))) به داخل بافت میگردد. به منظور آبگیری بافت ، نمونه را به ترتیب در ((الکل)) 50 درصد ، 70 درصد ، 90 درصد و مطلق قرار میدهند که با این عمل آب بافت ، جذب الکل شده و الکل جایگزین آن میشود. سپس نمونه را در داخل محلولی به نام ((گزیلول حلال پارافین است و امکان نفوذ آن را به بافت فراهم میکند.~گزیلول)) قرار میدهند که آن نیز جایگزین الکل میگردد. |
+ | بافتها بطور طبیعی دارای مقداری آب هستند که اگر از بافت خارج نگردد، مانع نفوذ برخی از مواد آماده کننده مانند ((پارافین)) به داخل بافت میگردد. به منظور آبگیری بافت ، نمونه را به ترتیب در الکل 50 درصد ، 70 درصد ، 90 درصد و مطلق قرار میدهند که با این عمل آب بافت ، جذب الکل شده و الکل جایگزین آن میشود. سپس نمونه را در داخل محلولی به نام ((گزیلول حلال پارافین است و امکان نفوذ آن را به بافت فراهم میکند.~گزیلول)) قرار میدهند که آن نیز جایگزین الکل میگردد. |
| !آغشته سازی (Infiltation) | | !آغشته سازی (Infiltation) |
- | در این مرحله نمونه را در داخل پارافین مذاب قرار میدهند تا به داخل بافت نفوذ کند. پارافین در دمای اطاق جامد است و در حرارت 50 درجه به صورت مذاب در میآید.
تا این مرحله از آماده سازی بافت ، هم بطور دستی و هم بطور اتوماتیک توسط دستگاهی به نام ((اتوتکنیکون)) امکانپذیر است. |
+ | در این مرحله نمونه را در داخل پارافین مذاب قرار میدهند تا به داخل بافت نفوذ کند. پارافین در دمای اطاق جامد است و در حرارت 50 درجه به صورت مذاب در میآید. تا این مرحله از آماده سازی بافت ، هم بطور دستی و هم بطور اتوماتیک توسط دستگاهی به نام __~~green:اتوتکنیکون~~__ امکانپذیر است. |
| !قالب گیری (Embedding) | | !قالب گیری (Embedding) |
| نمونه آغشته شده با پارافین در این مرحله ، در داخل قالب پر از پارافین مذاب ، قرار میگیرد. ضمن انجماد پارافین ، نمونه نیز در داخل باقیمانده و آماده مقطع گیری میگردد. | | نمونه آغشته شده با پارافین در این مرحله ، در داخل قالب پر از پارافین مذاب ، قرار میگیرد. ضمن انجماد پارافین ، نمونه نیز در داخل باقیمانده و آماده مقطع گیری میگردد. |
| + |
|
| + |
| + | |
| + | | |
| + |
|
| + | ::{img src=img/daneshnameh_up/4/47/histology3.JPG}:: |
| + | |
| + | |
| + | |
| + | | |
| + | |
| + | |
| + | __~~green:دستگاه میکروتوم~~__ |
| + | |
| + | |
| + | |
| + | |
| + | | |
| !مقطع گیری (Sectioning) | | !مقطع گیری (Sectioning) |
| نمونه همراه با قالب پارافین توسط دستگاهی به نام ((میکروتوم)) به ضخامت 5 تا 10 میکرون ، برش داده میشود. | | نمونه همراه با قالب پارافین توسط دستگاهی به نام ((میکروتوم)) به ضخامت 5 تا 10 میکرون ، برش داده میشود. |
| !چسباندن (Mounting) | | !چسباندن (Mounting) |
| در این مرحله ، برشهای تهیه شده روی لام حاوی ((ژلاتین)) قرار داده میشود تا روی لام بچسبد. پس از این مرحله ، نمونه آماده شده بایستی رنگ آمیزی شده و با میکروسکوپ مطالعه شود. | | در این مرحله ، برشهای تهیه شده روی لام حاوی ((ژلاتین)) قرار داده میشود تا روی لام بچسبد. پس از این مرحله ، نمونه آماده شده بایستی رنگ آمیزی شده و با میکروسکوپ مطالعه شود. |
| !رنگ آمیزی (Staining) | | !رنگ آمیزی (Staining) |
- | مرحله آخر آماده سازی بافت ، رنگ آمیزی است. سادهترین و معمولیترین نوع رنگ آمیزی که در اکثر آزمایشگاهها برای اطلاع از ساختمان بافتها انجام میگیرد، __رنگ آمیزی هماتوکسیلین _ ائوزین__ میباشد. ((هماتوکسیلین)) یک ماده رنگی بازی است و ساختمانهایی که با آن رنگ میگیرند، به رنگ ~~blue:آبی~~ تا ~~violet:بنفش~~ دیده میشوند و به __ساختمانهای بازوفیل__ موسوم هستند. ((ائوزین)) یک ماده رنگی اسیدی است و ساختمانهایی که با آن رنگ میگیرند، به رنگ ~~red:قرمز~~ دیده میشوند و به ساختمان __اسیدوفیل__ یا __ائوزوینوفیل__ موسوماند. به عنوان مثال ((هسته سلول|هسته)) بازوفیل و ((سیتوپلاسم)) اسیدوفیل است. |
+ | مرحله آخر آماده سازی بافت ، رنگ آمیزی است. سادهترین و معمولیترین نوع رنگ آمیزی که در اکثر آزمایشگاهها برای اطلاع از ساختمان بافتها انجام میگیرد، __~~green:رنگ آمیزی هماتوکسیلین _ ائوزین~~__ میباشد. هماتوکسیلین یک ماده رنگی بازی است و ساختمانهایی که با آن رنگ میگیرند، به رنگ آبی تا بنفش دیده میشوند و به ساختمانهای بازوفیل موسوم هستند. ائوزین یک ماده رنگی اسیدی است و ساختمانهایی که با آن رنگ میگیرند، به رنگ قرمز دیده میشوند و به ساختمان اسیدوفیل یا ائوزوینوفیل موسوماند. به عنوان مثال ((هسته سلول|هسته)) بازوفیل و ((سیتوپلاسم)) اسیدوفیل است. |
| !مباحث مرتبط با عنوان | | !مباحث مرتبط با عنوان |
- | *((اتوتکنیکون)) | |
| *((اهمیت بافت شناسی و روشهای مطالعه بافتها)) | | *((اهمیت بافت شناسی و روشهای مطالعه بافتها)) |
- | *((اوین)) *((بافت)) |
+ | *((بافت استونی)) *((بافت بدن)) |
| *((بافت شناسی)) | | *((بافت شناسی)) |
- | *((پافین)) *((فرملین)) *((مولهای ابت کنده)) *((هماتوکیی)) |
+ | *((بافت پوی)) *((بافت خون)) *((بافت چری)) *((بافت میچهای)) />*((افت مبند)) *((بافت صبی)) *((غضر)) |